第191章 遇到困难，找江河（1 / 5）
第191章 遇到困难，找江河
南医大这边。
江河不语，只是一味做项目。
实验室中，连易向晚都不讲笑话了，足以见得事情的严重程度。
这样也挺好，效率很高。
mirna早筛项目完成的进度条，正在迅速向前推进：
15%……18%……21%……
要是追女生也有这么明确的进度条就好了。
然而，科研不可能总是一帆风顺，尤其江河不在的时候。
这日下午，王教授坐镇推进逆转录和pcr扩增环节。
问题出现：
荧光定量pcr的扩增曲线呈现出杂乱状态，而更糟糕的是溶解曲线，出现了好几个杂乱的双峰。
蔡卓群叹了口气：“非特异性扩增严重，有引物二聚体。”
陈浩在旁，也稍微显得有些失落。
基本上，做出这种曲线，就意味着这批数据全废了……
蔡卓群：“王教授，您看这怎么处理？”
王晓晴分析：“茎环结构的自由能太低，导致构象过于稳定，如果在现有的反应体系下，常规的提高退火温度已经没用了。”
蔡卓群点点头：“那我们需要重新设计引物序列吗？可是如果要重新设计，得耽误很多时间。”
王晓晴皱着眉头。
她一时间也没什么好的办法。
第一反应是通过调整体系的镁离子浓度，或者重新设计巢式pcr的引物结构来从根本上解决非特异性结合。
但似乎，都需要耗费大量的时间去重新摸索。
就在这时。
江河回来了。
他察觉到气氛不对，随口问道：“怎么了？”
“老江，遇到麻烦了，扩增曲线乱了，引物二聚体和非特异性扩增把真实信号盖住了，王教授正在想怎么调整引物结构。”
江河走过去，看了一眼之后，淡然道：“去拿一瓶dmso（二甲基亚砜）过来。”
众人一愣。
王晓晴也转头看向他。
江河解释：“这套引物的gc含量在65%以上，自身容易形成复杂的二级结构，这很常见，重做引物太费事了，直接在pcr的反应体系里，加入终浓度为5%的dmso即可。” ↑返回顶部↑
南医大这边。
江河不语，只是一味做项目。
实验室中，连易向晚都不讲笑话了，足以见得事情的严重程度。
这样也挺好，效率很高。
mirna早筛项目完成的进度条，正在迅速向前推进：
15%……18%……21%……
要是追女生也有这么明确的进度条就好了。
然而，科研不可能总是一帆风顺，尤其江河不在的时候。
这日下午，王教授坐镇推进逆转录和pcr扩增环节。
问题出现：
荧光定量pcr的扩增曲线呈现出杂乱状态，而更糟糕的是溶解曲线，出现了好几个杂乱的双峰。
蔡卓群叹了口气：“非特异性扩增严重，有引物二聚体。”
陈浩在旁，也稍微显得有些失落。
基本上，做出这种曲线，就意味着这批数据全废了……
蔡卓群：“王教授，您看这怎么处理？”
王晓晴分析：“茎环结构的自由能太低，导致构象过于稳定，如果在现有的反应体系下，常规的提高退火温度已经没用了。”
蔡卓群点点头：“那我们需要重新设计引物序列吗？可是如果要重新设计，得耽误很多时间。”
王晓晴皱着眉头。
她一时间也没什么好的办法。
第一反应是通过调整体系的镁离子浓度，或者重新设计巢式pcr的引物结构来从根本上解决非特异性结合。
但似乎，都需要耗费大量的时间去重新摸索。
就在这时。
江河回来了。
他察觉到气氛不对，随口问道：“怎么了？”
“老江，遇到麻烦了，扩增曲线乱了，引物二聚体和非特异性扩增把真实信号盖住了，王教授正在想怎么调整引物结构。”
江河走过去，看了一眼之后，淡然道：“去拿一瓶dmso（二甲基亚砜）过来。”
众人一愣。
王晓晴也转头看向他。
江河解释：“这套引物的gc含量在65%以上，自身容易形成复杂的二级结构，这很常见，重做引物太费事了，直接在pcr的反应体系里，加入终浓度为5%的dmso即可。” ↑返回顶部↑